Conţinut

• Diferența principală
• Sud Blotting vs. Western Blotting
• Diagramă de comparație
• Ce este Southern Blotting?
• Ce este Western Blotting?
• Diferențele cheie
• Concluzie

Diferența principală

Principala diferență între Southern Blotting și Western Blotting este că Southern Blotting este o tehnică care este utilizată pentru a detecta un fragment de ADN specific într-un eșantion dat, în timp ce Western Blotting este utilizat pentru a afla o proteină specifică într-un eșantion dat.

Sud Blotting vs. Western Blotting

Blotting este o tehnică folosită de oamenii de știință pentru a separa diferite tipuri de molecule de un amestec sau o probă. În această tehnică, macromoleculele ca acizii nucleici (ADN și ARN) și proteinele dintr-un amestec se deplasează printr-o placă de gel. Aici, particulele minute se vor mișca mai repede decât cele mai mari. Aceste molecule sunt presate pe suprafața unei membrane imobilizate care transferă moleculele pe membrană. Există diferite tipuri de blotare pe baza detectării unui material specific, adică sudarea, sudarea nordică și cea occidentală. Southern blotting este tipul de blotting care este utilizat pentru a detecta ADN în timp ce western blotting este utilizat pentru a afla proteine. Southern blotting a fost dezvoltat de Edward M. Southern în 1975. Deci, este cunoscut sub numele de Southern blotting. Pe de altă parte, western blotting a fost dezvoltat de grupul lui George Stark de la Universitatea Stanford în 1979. Acest nume a fost folosit pentru a se potrivi cu sudarea blotting. Southern blotting este utilizat pentru a afla o secvență ADN specifică, în timp ce western blotting este utilizat pentru a afla un specific aminoacid sau o secvență de proteine.

Diagramă de comparație

Sud Blotting	Western Blotting
O tehnică care este folosită pentru a descoperi o secvență specifică de ADN într-un amestec dat este cunoscută sub denumirea de South Blotting.	O tehnică care este folosită pentru a afla o secvență de aminoacizi specifică a proteinei într-un amestec dat este cunoscută sub denumirea de sudare.
Dezvoltat de
Southern blotting a fost dezvoltat de Edward M. Southern în 1975.	Western blotting a fost dezvoltat de grupul lui George Stark la Universitatea Stanford în 1979.
Tipul de detectare
Southern blotting este utilizat pentru a afla o secvență ADN specifică.	Western blotting este utilizat pentru a afla un aminoacid specific sau o secvență de proteine.
Principiu
Funcționează pe principiul hibridizării.	Acționează pe principiul metodei de imunodetecție sau a interacțiunii antigen-anticorp.
Sonda
Ca sondă se utilizează un ADN monocatenar sau uneori ARN.	Anticorpii primari și secundari sunt folosiți ca sondă.
Electroforeză cu gel
Electroforeza cu gel de agaroză este utilizată în sudarea blotării.	SDS PAGE / Gel de poliacrilamidă utilizat pentru separarea proteinelor în apariția apelor
Procedura de blotting
Southern blotting urmează procedura de transfer capilar.	Western Blotting urmează procedura de transfer electric.
Probă
În timpul eliminării sudului, eșantionul trebuie denaturat.	În timpul blotării vestice, eșantionul trebuie să fie în starea sa natală.
blocarea
Nici un pas ca blocajul nu este implicat în sudarea sudului.	În timpul blotării occidentale, locurile de anticorp nespecifice sunt blocate pe hârtia de nitroceluloză cu ajutorul laptelui praf sau a albuminei serice bovine (BSA).
Metode de etichetare
Metodele obișnuite de etichetare care sunt utilizate în sudarea prin sudare sunt utilizarea de coloranți cromogeni sau de etichetare radio sau marcajă fluorescentă etc.	Metodele de etichetare utilizate în western blotting sunt utilizarea anticorpului sau marcajului fluorescent, a coloranților cromogeni sau formarea diaminobenzidinei etc.
Metode de detectare
Detectarea luminii, Autoradiograful și modificările de culoare sunt utilizate ca metode de detectare în sudarea sudurilor.	Metodele de detectare în western blotting sunt schimbări de culoare și detectarea luminii etc.
cerere
Southern blotting este utilizat în detectarea ADN-ului, testarea paternității, atingerea ADN-ului, pentru identificarea victimei, pentru identificarea infractorilor, pentru găsirea agenților infecțioși și pentru identificarea mutației sau rearanjării genelor etc.	Western blotting este utilizat pentru a găsi numărul de proteine ​​dintr-un amestec, pentru a detecta prezența HIV, virus și bacterii, etc. în ser, pentru a găsi proteine ​​defecte și utilizat ca măsură definită pentru herpes, hepatită B, Lyme boala si boala Creutzfeldt-Jacob etc.

Ce este Southern Blotting?

Southern blotting este cea mai veche metodă de blotting care a fost oferită de Edwin Southern astfel, denumită South Blotting. Este utilizat pentru a afla o secvență specifică de ADN într-un eșantion sau amestec dat. Etapele implicate pe parcursul sudării sunt electroforeza, transferul și detectarea secvențelor specifice. În primul rând, ADN-ul este fragmentat cu ajutorul enzimei de restricție specifice. Apoi fragmentele de ADN dorite sunt separate prin electroforeza cu gel. Aceste fragmente sunt denaturate cu ajutorul unei soluții alcaline, de exemplu, NaOH etc. pentru a separa cele două catene de ADN. Aceste fragmente de ADN monocatenare s-au transferat apoi pe o membrană prin procesul de blotare. Acest ADN legat de membrană este apoi tratat cu o sondă marcată. Această sondă se va atașa de cablul său complementar pe ADN-ul membranei, care poate fi vizualizat prin autoradiogramă etc.

Ce este Western Blotting?

Metoda Western Blotting a fost inventată de grupul lui George Stark de la Universitatea Stanford, care este utilizată pentru a identifica o secvență specifică de aminoacizi din proteină. Este, de asemenea, cunoscut sub numele de proteine ​​blot sau imun-blotting. Etapele în timpul blotării occidentale sunt electroforeza, transferul și detectarea proteinelor specifice. În primul rând, omogenizați amestecul. Apoi, separați molecula de interes cu ajutorul electroforezei. Transferați aceste molecule pe membrană și identificați proteina specifică folosind sonda specifică.

Diferențele cheie

1. O tehnică care este utilizată pentru a afla o secvență de ADN specifică într-un amestec dat este cunoscută sub denumirea de sudare sudică, în timp ce o tehnică care este utilizată pentru a afla o secvență de aminoacizi specifică a proteinei într-un amestec dat este cunoscută sub denumirea de sudare.
2. Southern blotting a fost dezvoltat de Edward M. Southern în 1975, cunoscut sub numele de south blotting. Pe de altă parte, western blotting a fost dezvoltat de grupul lui George Stark de la Universitatea Stanford în 1979.
3. Southern blotting este utilizat pentru a afla o secvență ADN specifică. În schimb, Western Blotting este utilizat pentru a afla un aminoacid specific sau o secvență de proteine.
4. Southern blotting funcționează pe principiul hibridizării pe partea flip; western blotting funcționează pe principiul metodei de imunodetecție sau a interacțiunii antigen-anticorp.
5. Un ADN monocatenar sau uneori ARN este utilizat ca sondă în sudarea Sudului pe cealaltă parte, în anticorpii de blotare occidentală primarii și secundarii sunt folosiți ca sondă.
6. Electroforeza cu gel de agaroză este utilizată în sudarea blândului, în timp ce SDS PAGE / Gel de poliacrilamidă se utilizează pentru separarea proteinelor în Western Blotting.
7. South blotting urmează procedura de transfer capilar, pe de altă parte; western Blotting urmează procedura de transfer electric.
8. În timpul blotării sudului, eșantionul trebuie denaturat, în timp ce, în timpul blotării vestice, eșantionul trebuie să fie în starea sa natală.
9. Nici o etapă de blocare nu este implicată în sudarea sudului pe partea flip, în timpul blotting-ului occidental, locurile de anticorpi nespecifice sunt blocate pe hârtia nitroceluloză cu ajutorul laptelui praf sau a albuminei serice bovine (BSA).
10. Metodele obișnuite de etichetare care sunt utilizate în sudarea prin sudare sunt utilizarea coloranților cromogeni sau a marcajelor radio-marcante sau fluorescente etc., în timp ce, metodele de etichetare utilizate în western blotting sunt utilizarea anticorpului sau radiomarcajului cu marcaj fluorescent, coloranților cromogeni sau formarea diaminobenzidinei etc.
11. Detectarea luminii, Autoradiograful și Schimbările de culoare sunt utilizate ca metode de detectare în sudarea sudului, în timp ce, metodele de detectare în Western Blotting sunt schimbări de culoare și detectarea luminii etc.
12. Southern blotting este utilizat în detectarea ADN-ului, testarea paternității, atingerea degetelor ADN, pentru identificarea victimei, pentru identificarea infractorilor, pentru a găsi agenți infecțioși și pentru a identifica mutația sau rearanjarea genelor etc. În schimb, Western Blotting este utilizat pentru a găsi numărul de proteine ​​într-o amestec, pentru a detecta prezența HIV, virus și bacterii, etc. în ser, pentru a afla proteine ​​defecte și utilizate ca măsură definită pentru herpes, hepatită B, boala Lyme și boala Creutzfeldt-Jacob etc.

Concluzie

În discuțiile de mai sus se rezumă că sudarea sudului este cea mai veche tehnică de blotare utilizată pentru a afla segmentul ADN specific într-un eșantion în timp ce Western blotting a fost descoperită din urmă și folosită pentru identificarea unei secvențe specifice de aminoacizi sau a unei proteine ​​specifice.